میکرواَرِی یا بیوچیپ حاوی یکسری قطعات DNA برای شناسایی سریع تعداد زیادی از توالی های نوکلئوتیدی با هیبریداسیون تک مرحله ایی می باشد. این روش برای تشخیص میکروارگانیسم ها و تشخیص جهش های ایجاد کننده مقاومت آنتی بیوتیکی مفید می باشد. ابتدا DNA مورد نظر (که می تواند همان cDNA های تکثیر شده از mRNA استخراج شده باشد) توسط مواد فلورسنتی نشاندار می شوند و سپس بر روی لام مخصوص متصل می شود. پس از نشاندار شدن مولکولهای cDNA عملیات شستشو انجام گرفته تا اتصالات غیر اختصاصی جدا شود.

محصولات PCR که توسط مواد فلورسنت نشاندار شده اند به قطعات DNA حاوی پروب های نوکلئوتیدی متصل می شوند. محصولات باند شده از خود رنگ فلورسنت را ساطع نموده که به وسیله یک آشکار کننده مشخص می شود.

از دیگر تکنیک های تشخیصی در این زمینه می توان به روش لاین پروب اسی اشاره کرد که بر اساس هیبریداسیون معکوس طراحی شده است و پلتفرمی را برای هیبریداسیون اختصاصی پروب انجام می دهد. بطوریکه پروب های DNA اختصاصی بر روی یک سطح جامد نظیر نوارهای نیتروسلولزی ایموبلایز می شوند و سپس محصول تکثیر شده به صورت اختصاصی به پروب مورد نظر متصل می شود.

پروسه ی این روش از 4 قسمت تشکیل شده است:

1. جداسازی DNA از نمونه
2. تکثیر هدف DNA با استفاده از روش PCR
3. اتصال محصول PCR به پروب ها با استفاده از روش هیبریداسیون معکوس
4. تفسیر نتایج

روش هیبریداسیون معکوس دارای چندین مزیت می باشد:

1. هیبریداسیون بسیار اختصاصی است و اجازه می دهد موتاسیون های تک نوکلئوتیدی شناسایی شود.
2. فرایند دتکشن بسیار حساس بوده خصوصا در یافتن مقدار کم محصولات تکثیر شده.
3. تفسیر نتیجه آزمایش بسیار ساده و آسان می باشد.
4. مدت زمان انجام تست کوتاه و سریع می باشد (حدود 7 ساعت همراه با تکثیر نمونه).

 سرفصلها:

بخش تئوری:

• تعریف Line Probe assay
• آماده سازی نوار نیتروسلولز
• فرایند هیبریداسیون معکوس
• توضیح مفاهیم
• انواع کاربردهای LPA

بخش عملی:

• طراحی پروژه
• فرایند کامل تکنیک Line Probe assay بر روی نمونه
• آنالیز و تفسیر نتایج     

---

شهریه: 5 میلیون تومان

تاریخ برگزاری: …………….

پیشنیاز: آشنایی با PCR  (جهت آموزش اینجا کلیک کنید)
جهت ثبت نام در کارگاه لاین پروب اسی اینجا کلیک نموده و یا برای کسب اطلاعات بیشتر با شماره تلفن 09126468346 تماس حاصل نمایید.